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培養(yǎng)昆蟲細(xì)胞一定要注意這幾點!
點擊次數(shù):475 更新時間:2022-11-03

昆蟲細(xì)胞是主要提取來自昆蟲的一類真核細(xì)胞。通過培養(yǎng)制造宿主的病毒,可以引起昆蟲流行病,但對人畜和植物無害,因而可作病毒殺蟲劑,還可以生產(chǎn)某些藥用蛋白。細(xì)胞培養(yǎng)瓶是培養(yǎng)昆蟲細(xì)胞常用的一種細(xì)胞培養(yǎng)耗材,那么在培養(yǎng)昆蟲細(xì)胞時需要注意哪些問題呢?

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1、溫度與環(huán)境:昆蟲細(xì)胞一般應(yīng)該在27℃、非濕化的環(huán)境中培養(yǎng),建議不要進行二氧化碳交換,所以細(xì)胞培養(yǎng)瓶盡量選擇密閉的蓋子。

2、培養(yǎng)基:不同細(xì)胞對培養(yǎng)基的需求也有所差異,應(yīng)該根據(jù)細(xì)胞生長特性,選擇昆蟲細(xì)胞專用的培養(yǎng)基。

3、貼壁昆蟲細(xì)胞:細(xì)胞密度低于匯合狀態(tài)的20% 時,細(xì)胞生長會受到抑制。健康狀態(tài)的細(xì)胞是對數(shù)期收獲的細(xì)胞,所以在傳代時應(yīng)選擇對數(shù)期進行。但是,如果培養(yǎng)的是強貼壁性昆蟲細(xì)胞,則應(yīng)在細(xì)胞達到匯合狀態(tài)或者剛剛開始從培養(yǎng)瓶底部脫離時進行傳代,因為此時細(xì)胞容易脫離。

4、貼壁昆蟲細(xì)胞在無血清培養(yǎng)條件下,昆蟲細(xì)胞與基質(zhì)貼附非常牢固,需要花費較大力氣才能使其脫落。要使細(xì)胞脫落,可以采用拍掌的動作快速振搖一下細(xì)胞培養(yǎng)瓶。為了避免污染,進行此操作前必須蓋緊蓋子。

5、懸浮培養(yǎng):一些昆蟲細(xì)胞系可能需要一定的過程來適應(yīng)懸浮培養(yǎng)。進行細(xì)胞懸浮培養(yǎng)時無需更換培養(yǎng)基,定期傳代時需要吸出細(xì)胞懸液,然后加入適量培養(yǎng)基,將細(xì)胞稀釋到適當(dāng)?shù)拿芏?。添加新鮮培養(yǎng)基后可使細(xì)胞營養(yǎng)素達到完/全補充。

以上是細(xì)胞培養(yǎng)瓶培養(yǎng)昆蟲細(xì)胞需要注意的五個方面,此外還要注意盡量不要劇烈搖晃細(xì)胞培養(yǎng)瓶,避免對細(xì)胞造成損傷。

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